為什么有的物質(zhì)激發(fā)后能發(fā)出熒光，有的不能？

　　不同熒光蛋白在激發(fā)光源的激發(fā)下發(fā)出不用的光，便于生物基因的表達(dá)與調(diào)控、蛋白質(zhì)的定位、轉(zhuǎn)移、信號傳遞、細(xì)胞分離和純化的觀察與研究。

　　熒光蛋白(GFP)在激發(fā)光源的激發(fā)下能發(fā)出熒光，可用于生物工程研究，生活中的熒光棒在吸收足夠的光源可在黑暗中發(fā)出熒光，然而還是有很多物質(zhì)不能發(fā)出熒光，為什么呢？

　　我們先來看看分子吸收光譜與產(chǎn)生熒光的機制：

　　當(dāng)物質(zhì)分子吸收某些特征頻率的光子以后，可由基態(tài)躍遷至第一或第二電子激發(fā)態(tài)中各個不同振動能級和各個不同轉(zhuǎn)動能級。處于激發(fā)態(tài)的分子通過無輻射弛豫（例如，與其它分子碰撞過程中消耗能量，或者對分子組織而言，誘發(fā)光化反應(yīng)而消耗能量等）降落至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級，然后再由這個最低振動能級以輻射弛豫形式躍遷到基態(tài)中各個不同的振動能級，發(fā)出分子熒光，然后再無輻射弛豫至基態(tài)中最低振動能級。

　　幾乎所有物質(zhì)分子都有吸收光譜，但不是所有的物質(zhì)都會發(fā)出熒光，因為產(chǎn)生熒光必須具備以下條件：

　　吸收了與本身特征頻率相同的能量之后的物質(zhì)分子，必須具有很高的熒光效率。很多吸光物質(zhì)并不產(chǎn)生熒光，主要是因為它們將所吸收能量消耗于與溶劑分子或其他分子之間的相互碰撞中，還可能消耗于一次光化學(xué)反應(yīng)中，因而無法發(fā)射熒光，即熒光效率很低。

　　該物質(zhì)分析必須具有與所照射的光線相同的頻率，這與分子的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。